Устройство для воздействия излучением лазера на участок биологического объекта с визуализацией процесса
1
Продукт
Это четыре варианта специально сконструированных молекул РНК (gRNA-HF-HF, gRNA-HF-HD, gRNA-HD-HF, gRNA-HD-HD), которые служат «навигаторами» для нуклеазы SpCas9 в системе редактирования генома. В обычные направляющие РНК вместо двух стандартных фрагментов (GAAA) встроены особые последовательности — субдомены транспортной РНК лизина (HF и HD). Эти модификации позволяют РНК связываться с двумя человеческими белками (pre-KARS2 и ENO2), которые естественным образом импортируются в митохондрии. В результате вся сборка (РНК + белки) проникает внутрь митохондрий. Там модифицированная РНК встречается с нуклеазой SpCas9, образует с ней функциональный комплекс и направляет её на разрезание строго определённых участков митохондриальной ДНК. Разрезанные молекулы мтДНК разрушаются, а здоровые остаются.
Область применения
Применяется в медицине и молекулярной биологии для терапии наследственных митохондриальных заболеваний (вызванных мутациями в мтДНК), а также в репродуктивных технологиях (например, для удаления «старых» митохондрий при донорстве). Ключевые преимущества: Впервые решена проблема доставки РНК-компонента системы CRISPR внутрь митохондрий без использования вирусных векторов (что особенно важно для работы с яйцеклетками и эмбрионами). Модификации не нарушают способность РНК связываться с нуклеазой SpCas9 и направлять её на нужный участок ДНК. Позволяет избирательно удалять нежелательные варианты мтДНК (например, мутантные или донорские), сдвигая баланс в сторону здоровых копий. Эффективный импорт подтверждён экспериментально: модифицированные РНК обнаруживаются в митохондриях в количестве 650–700 копий, в то время как немодифицированные — нет.
Патент
Патент на ИЗ №2717977 от 27.03.2020