Устройство для воздействия излучением лазера на участок биологического объекта с визуализацией процесса
1
Продукт
Это две специально сконструированные плазмиды (кольцевые молекулы ДНК) — pMitoCas9-BE4-Gam и pMitoCas9-ABE7.10, которые кодируют улучшенные версии нуклеаз для редактирования генома. В отличие от обычной Cas9, которая режет ДНК, эти белки являются «редакторами оснований» (base editors): они химически изменяют одно азотистое основание в ДНК, не разрывая её цепь. Конструкции содержат митохондриальную лидерную последовательность (от гена СОХ8А), которая обеспечивает доставку синтезированных белков внутрь митохондрий, а также флуоресцентный маркер TurboGFP для отслеживания. В митохондриях белок Cas9-BE4-Gam исправляет мутацию типа C:G на T:A (дезаминирует цитозин), а Cas9-ABE7.10 исправляет мутацию A:T на G:C (превращает аденин в инозин, который при репликации воспринимается как гуанин). Обе системы работают в комплексе со специальной направляющей РНК, которая указывает точное место для редактирования.
Область применения
Применяется в медицине и молекулярной биологии для терапии наследственных митохондриальных заболеваний, вызванных точечными мутациями в митохондриальной ДНК (например, некоторые формы митохондриальных миопатий, нейродегенераций). Выбор конкретной системы зависит от типа мутации. Ключевые преимущества: Позволяют исправлять точечные мутации без внесения опасных двухцепочечных разрывов в ДНК (в отличие от обычной Cas9), что снижает повреждающее действие на клетку. Могут работать даже в состоянии гомоплазмии (когда все копии мтДНК мутантны), тогда как обычные нуклеазы только сдвигают соотношение мутантных и здоровых копий. Две независимые системы покрывают два основных типа замен нуклеотидов (C→T и A→G), что расширяет спектр терапевтических мишеней. Наличие флуоресцентной метки позволяет легко контролировать эффективность доставки конструкций в клетки.
Патент
Патент на ИЗ №2709739 от 19.12.2019